孔雀石绿是一种带有金属光泽的绿色结晶体，又名碱性绿、严基块绿、孔雀绿，其既是杀真菌剂，又是染料，易溶于水，溶液呈蓝绿色。长期以来，渔民都用它来预防鱼的水霉病、鳃霉病、小瓜虫病等，而且为了使鳞受损的鱼延长生命，在运输过程中和存放池内，也常使用孔雀石绿。研究显示，孔雀石绿在鱼内残留时间很长，且其具有高性、高残留和致癌、致畸、致突变等副作用，鉴于此，许多国家均将孔雀石绿列为水产养殖禁用药物。

【检测原理】

孔雀石绿快速检测卡是采用免疫竞争法分析原理结合胶体金标记技术设计的一种快速检测试剂，适用于水产品中孔雀石绿的检测。  

样本溶液滴入检测卡的加样孔后，样本溶液中的药物与金标抗体相结合，从而阻止金标抗体与纤维素膜上药物偶联物结合。当样本溶液中的药物含量大于检测限时检测线不显色，结果为阳性；当样本溶液中药物含量小于检测限时检测线显紫红色，结果为阴性。

【检测灵敏度】

孔雀石绿灵敏度为1ppb。

【样品处理】

1、取切碎的一定量的去脂肪组织样本，用均质机均质；

2、称取5 g均质物于50 ml离心管中；

3、向上述50ml管中加入提取剂1溶液3ml，提取剂2溶液1 ml ，然后加入5 ml乙腈，再加入一包提取剂3，盖上盖子剧烈振荡2 min后，室温下4000 rpm离心5 min；

4、移取7 ml上清液于15 ml离心管中，加入二氯甲烷4ml后，盖上盖子颠倒混匀10秒钟，室温下4000 rpm离心2 min，弃上清液，移取下层有机相5ml于5 ml 离心管中，加入50μL催化剂，60μL氧化剂，颠倒混匀10秒，于6 0℃环境下，利用氮气或空气吹干。

5、向吹干的离心管中加入0.3 ml MG复溶液，和正己烷0.5 ml，于室温下4000 rpm离心1 min，用移液器移取下层75μl溶液，待检。

【操作步骤】

1、从检测卡袋中取出所需的检测卡，放置室温复温，在卡上做好样品编号标记。

2、用一次性取样滴头吸取样品，滴入加样孔3滴（75ul），在加液过程中勿使液体溢出加样孔。

3、5-10分钟内观察结果，15分钟后的结果无效。

【储存条件】

1、在4-30℃阴凉避光干燥处储存，忌冷冻。

2、在4-30℃下的环境温度操作。

3、有效期见包装盒侧面。

4、保存期间应避免光照、潮湿和过热。检测卡保质期为12个月。

5、检测线T出现，产品失效。

【注意事项】

1、过期或铝箔袋破损的产品，均不可使用。

2、打开的检测卡应尽快使用以免受潮后失效。

3、不要触摸检测卡中央的白色膜面。

4、取液滴管不可混用，以免交叉污染。

5、待检样品溶液需清亮、无混浊颗粒、无细菌污染，否则容易导致阻塞、显色不明显等异常现象，从而影响实验结果的判定。

【结果判读】

阴性（-）：测试区（T）和质控区（C）均出现红色条带，判定为阴性。

阳性（+）：仅质控区（C）出现一条红色条带，判定为阳性。

无效：质控区（C）未出现红色条带，建议重做。